親水色譜柱,即親水作用色譜柱(HILIC),是一種專為分離極性和親水性化合物設(shè)計(jì)的色譜柱,廣泛應(yīng)用于分析化學(xué)領(lǐng)域。其通過(guò)極性固定相(如裸硅膠、氨基、酰胺、二醇基等)與高比例有機(jī)溶劑(如乙腈)和低比例水組成的流動(dòng)相相互作用,實(shí)現(xiàn)分離。固定相表面形成一層“富水層”,極性分析物進(jìn)入該層被保留,不同化合物因分配系數(shù)差異而分離。此外,氫鍵作用、偶極-偶極相互作用及靜電作用等次級(jí)效應(yīng)也參與保留過(guò)程。
親水色譜柱其應(yīng)用范圍廣泛,涵蓋多個(gè)領(lǐng)域,以下是主要應(yīng)用場(chǎng)景:
1、代謝組學(xué)與小分子分析
代謝物檢測(cè):
用于分離和鑒定生物樣本(如血液、尿液、細(xì)胞提取物)中的內(nèi)源性代謝物(如氨基酸、糖類、脂質(zhì)代謝中間產(chǎn)物)。
優(yōu)勢(shì):可有效分離極性代謝物,避免傳統(tǒng)反相色譜(C18)對(duì)強(qiáng)極性物質(zhì)的保留不足問(wèn)題。
小分子藥物分析:
適用于極性藥物及其代謝產(chǎn)物的分析,例如抗生素、核苷類藥物、多肽等。
2、脂質(zhì)與糖類分析
脂質(zhì)組學(xué):
用于分離磷脂、鞘脂、甘油三酯等極性脂質(zhì),尤其是對(duì)溶血磷脂、游離脂肪酸等強(qiáng)極性脂質(zhì)的分離效果x著。
優(yōu)勢(shì):在正相模式下,脂質(zhì)按極性強(qiáng)弱分離,補(bǔ)充反相色譜(如C18)對(duì)非極性脂質(zhì)(如膽固醇)的分離能力。
糖類與糖醇分析:
適用于單糖、雙糖、低聚糖及糖醇(如葡萄糖、蔗糖、赤蘚糖醇)的分離檢測(cè)。
3、天然產(chǎn)物與中藥成分分析
極性活性成分分離:
用于分離中藥或天然產(chǎn)物中的極性成分,如皂苷、黃酮苷、多酚、生物堿鹽等。
優(yōu)勢(shì):可彌補(bǔ)反相色譜對(duì)強(qiáng)極性成分保留弱的問(wèn)題,適合復(fù)雜體系的整體分析。
4、環(huán)境與食品分析
環(huán)境污染物檢測(cè):
用于分析水樣或土壤提取液中的極性有機(jī)污染物(如部分農(nóng)藥、染料、塑化劑降解產(chǎn)物)。
食品成分分析:
檢測(cè)食品中的極性添加劑(如甜味劑、防腐劑)、維生素、氨基酸等。
5、生物大分子與蛋白組學(xué)
肽段與核苷酸分析:
適用于短肽、寡核苷酸(如siRNA、miRNA)的分離,尤其適合極性或帶電荷的生物大分子。
蛋白水解產(chǎn)物分析:
用于分離蛋白酶解后的極性肽段,輔助蛋白質(zhì)組學(xué)研究。
6、藥物研發(fā)與雜質(zhì)分析
極性雜質(zhì)分離:
在藥物合成或制劑過(guò)程中,用于檢測(cè)原料藥或輔料中的強(qiáng)極性雜質(zhì)(如降解產(chǎn)物、異構(gòu)體)。
手性化合物分析:
結(jié)合手性固定相(CSP),可用于分離極性手性化合物(如氨基酸衍生物)。
7、其他特殊應(yīng)用
極性染料與聚合物分析:
用于分離水溶性染料、極性高分子聚合物(如PEG、多糖衍生物)。
臨床診斷與生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn):
在血漿、血清等生物樣本中,用于富集和分離低豐度的極性代謝標(biāo)志物。